关于病毒采样管的使用

关于病毒采样管的使用

咽拭子

1、口咽取样:先用压舌板压住舌头,然后将采样拭子头部伸入咽喉部位擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,轻度用力拭抹咽后壁部位,应避免触及舌部。

2、鼻咽取样:以拭子测量鼻尖到耳垂的距离并用手指做标记,将采样拭子以垂直鼻子(面部)方向插入鼻腔,拭子伸入距离最少应达耳垂部位到鼻尖长度的一半,使拭子在鼻内停留15-30秒,轻轻旋转3-5次,抽出拭子。

从使用方法不难看出,不管是口咽拭子还是鼻咽拭子,采样都是一个技术活,难度高、易污染,采集样品的质量直接关系到后续的检测,如果采集的样本病毒载量低,容易造成假阴性,难以确诊。

目前市场上销售的试剂盒推荐使用的样本多为口咽拭子或鼻咽拭子以及肺泡灌洗液,若使用静脉血液样本特别是专用的核酸检测管收集血液,提取纯化RNA后进行检测,这样可以大大减轻采样人员的工作难度。毕竟采集静脉血液样本的难度不高,而且像检测丙型肝炎RNA一样,5毫升左右EDTA抗凝的血液样本分离血浆,所提取纯化的RNA完全可以满足PCR检测的需要。

病毒采样管保存液主要有两种

病毒采样管保存液主要有两种

市场上广泛使用的病毒采血管保存液主要有两种,一种是以运送培养基为基础改良的病毒维持液,另一种则为核酸提取裂解液改良的保存液。

咽拭子

前者的主要成分是Eagle’s基础培养液(MEM)或Hank’s平衡盐,添加了病毒生存所需的盐类、氨基酸、维生素、葡萄糖以及蛋白质,这种保存液使用酚红钠盐做为指示剂,溶液pH值在6.6-8.0时溶液呈粉红色。保存液中添加了必须的葡萄糖、L-谷氨酰胺和蛋白质,蛋白质的提供形式有胎牛血清或牛血清白蛋白,可以稳定病毒的蛋白质外壳。由于保存液营养成分丰富,有利于病毒的成活但是也有利于细菌的生长,如果保存液中污染了细菌,则会大量繁殖,其代谢产物中的二氧化碳会使保存液pH值下降,从粉红色变为黄色。因而大多数厂家都在配方中添加了抑菌剂成分,推荐使用的抑菌剂为青霉素、链霉素、庆大霉素及多粘菌素B等,不推荐使用叠氮钠、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(MCI)和 5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(CMCI)等抑制剂,因为这些组分对PCR反应有影响。由于这种保存液提供的样本基本是活病毒,可以最大程度保持样本的原始性,后续不仅可以用于病毒的核酸提取检测,还能用于病毒的培养和分离。但是用于检测时应该注意的是必须灭活以后再进行核酸提取纯化。深圳市华晨阳科技有限公司

另一种以核酸提取裂解液为基础配制的保存液,主要成分为平衡盐类、EDTA螯合剂、胍盐(如异硫氰酸胍、盐酸胍等)、阴离子表面活性剂(如十二烷基硫酸钠)、阳离子表面活性剂(如十四烷基三甲基草酸铵)、苯酚、8-羟基喹啉、二硫苏糖醇(DTT)、蛋白酶K等几种或多种组分,这种保存液是直接裂解病毒释放核酸,消除核酸分解酶(RNase),如果仅用于RT-PCR较为合适,但裂解液可以灭活病毒,这种样本不能用于病毒的培养分离。

病毒采血管保存液使用的金属离子螯合剂推荐使用EDTA盐类(如乙二胺四乙酸二钾、乙二胺四乙酸二钠等),不推荐使用肝素类(如肝素钠、肝素锂),以免影响PCR检测。

病毒采样管采样拭子直接接触采样部位

病毒采样管采样拭子直接接触采样部位

病毒采血管采样拭子直接接触采样部位,其采样头的材质与后续的检测关系密切。病毒采血管采样拭子头应该采用Polyester(PE)合成纤维或Rayon(人造纤维)制成,不能使用海藻酸钙海绵或木棒拭子(包括竹签),拭子头部的材料也不能为棉花制品,因为棉花的纤维对蛋白质的吸附较强,不易洗脱到后续的保存液中;而含有海藻酸钙和木制成分的木棒或竹签折断后浸泡在保存液中也会吸附蛋白,甚至会对后续的PCR反应有抑制作用。

病毒采样管拭子

制造拭子头的材料推荐使用PE纤维、聚酯纤维、聚丙烯纤维等合成纤维,不推荐棉花等天然纤维,也不推荐尼龙类的纤维,因为尼龙类纤维(类似于牙刷刷头)吸水性不佳,导致采样量不足,影响检出率。采样拭子材料禁用海藻酸钙海绵!拭子柄有折断式、内置式两种。折断式拭子在采样后放入保存管内从靠近采样头部位折断后旋紧管盖即可;内置式拭子在采样后直接将采样拭子放入保存管,将保存管管盖内置的小孔对准手柄顶端旋紧管盖即可。两种方式比较起来,后者相对安全。折断式拭子在配合使用尺寸较小的保存管时,折断时可能会导致管内液体外溅,应充分注意产品使用不当可能造成的污染风险。制造拭子柄的材料推荐使用空心聚苯乙烯(PS)挤出管或聚丙烯(PP)注塑压痕管,无论使用何种材料都不能添加海藻酸钙类助剂;不推荐使用木棒或竹签。总之,病毒采血管采样拭子应保证采样量和释放量,所选材料不能有影响后续检测的物质。

 

如何选择病毒采样管?

如何选择病毒采样管?

广泛使用的病毒保存液主要有两种,一种是以运送培养基为基础改良的病毒维持液型保存液(非灭活保存液),另一种则为核酸提取裂解液改良的裂解型保存液(灭活保存液)。因采集的样本后续可能会涉及到多种检测方法,灭活保存液仅能进行病毒的核酸提取检测,非灭活保存液不仅可用于病毒的培养、分离及抗原的检测等,还可用于病毒的核酸提取检测。但是,需要注意的是,无论选用哪种保存液的采样管,为了保证操作人员的安全,检测前均应进行严格的灭活处理。

我们往往关注核酸降解的问题,针对此次新冠疫情,这可能是一个伪命题或者伪需求。现如今,发热门诊要求6小时甚至4小时出检测结果,核酸几乎连自杀的时间都没有。即便“愿检尽检”的样本,24小时之内也会进行检测。而真的要长期保存,—80℃冻存是比较可靠的办法,基本上都能满足。

病毒采样管

 

保存液存放一段时间后,容易腐败坏掉。清亮的保存液变浑浊、长霉菌、长细菌、保存液由橙色变成黄色,晚节不保,令人唏嘘。这种肉眼可见的物理性状的改变,暗示着保存液已经变质,严重影响企业形象及产品的品质。防止污染,无疑是研发、生产、品控过程的不小挑战。当然,也并不难处理,洁净车间、添加抗生素、稳定的缓冲体系等举措,都能够从容应对。生产病毒采样管厂家:深圳市华晨阳科技有限公司

有些保存液,打开箱子或盒子一看,管子漏液了。管壁上“垂涎欲滴”,纸箱上“劣迹斑斑”,沾得手上、实验台上、仪器上等到处都是,有些看的见、有些看不见,实验环境很容易受污染。箱子运输过程,野蛮装卸或者受航空运输的负压影响,就容易发生渗漏,整盒整箱都得报废。国内还好,到了国外,退单、退货、中止合约,非常棘手。故要在采样管身和管盖的材质遴选、结构设计、制造工艺等方面下点功夫,宜使用聚乙烯-丙烯聚合物塑胶及某些特殊处理的聚丙烯(PP)、聚碳酸酯(PC)塑胶等容器,需密闭性好,耐高低温,可适合多种灭活方式,并做好负压测试。

有些采样拭子病毒载量低、折断点不合适、操作人员不易折断等,不仅限制了采样的效率,还易造成核酸检测的假阴性。故采样拭子头应采用合成纤维植绒为宜,不应选择棉花或者海藻酸钙海绵等材质;拭子柄的材料推荐使用空心聚苯乙烯(PS)挤出管或聚丙烯(PP)注塑压痕管,不可用木棒或者竹签等材质。因含有海藻酸钙和木制成分的木棒或竹签折断后浸泡在保存液中会吸附蛋白,甚至会对后续的试验有干扰作用,棉花的纤维对蛋白质的吸附较强,不易洗脱;拭子长度不宜过短,且折断位置也不宜太接近拭子头部,以免操作时沾染到患者体液;折断点位置要合理,配合采样管折断时,避免管内液体外溅造成的污染风险。

一次性使用病毒采样管

一次性使用病毒采样管

◆符合GMP要求的无菌车间灌装,确保产品质量。

◆在汉克斯溶液的基础上,加入牛血清白蛋白V和HEPES 等病毒稳定成分,在较宽的温度范围内保持病毒活性,有利于后续样品的核酸提取和病毒的分离培养。

◆采用具有警示功能的红色管盖,防止和灭活型混淆,降低风险。

◆采样拭子:尺寸2.5x150mm,咽拭子3cm折断点,鼻拭子8cm和10CM折断点。

◆样品输送管:Φ16×95/Φ16×98(10ml)。

◆运输介质:3ml/管。

◆生物危害标本袋:4”x6”

货号 详细内容 型号 备注
huachenyang 用10ml 管分装3ml保存液,一个咽拭子 HUACHENYANG 保活型
huachenyang 用10ml 管分装3ml保存液,一个鼻拭子
huachenyang 用10ml 管分装3ml保存液,一个咽拭子,一个鼻拭子

灭活型

◆主要使用胍盐(YH-I)或锂盐(YH-III)作为蛋白质变性剂和核酸酶抑制剂,使病毒处于不活跃的状态,同时又不影响病毒核酸的完整性,有利于核酸的提取和后续样品的分析。在检验和运输过程中更安全,但不适合分离培养。

◆采样拭子:尺寸2.5x150mm,咽拭子3cm折断点,鼻拭子8cm和10CM折断点。

◆样品输送管:Φ16×58(5ml),Φ16×95/Φ16×98(10ml)。

◆运输介质:2ml/管,3ml/管

货号 详细内容 型号 备注
huachenyang 用5ml 管分装2ml保存液,一个咽拭子 huachenyang 灭活型、胍盐体系
huachenyang 用5ml 管分装3ml保存液,一个咽拭子
huachenyang 用10ml 管分装3ml保存液,一个咽拭子
huachenyang 用10ml 管分装3ml保存液,一个鼻拭子
huachenyang 用10ml 管分装3ml保存液,一个咽拭子,一个鼻拭子
huachenyang 用5ml 管分装2ml保存液,一个咽拭子 huachenyang 灭活型、锂盐体系
huachenyang 用5ml 管分装3ml保存液,一个咽拭子
huachenyang 用10ml 管分装3ml保存液,一个咽拭子
huachenyang 用10ml 管分装3ml保存液,一个鼻拭子
huachenyang 用10ml 管分装3ml保存液,一个咽拭子,一个鼻拭子

十一、【厂家信息】

【生产企业名称】深圳市华晨阳科技有限公司

【住所】深圳市宝安区沙井街道洪田上南东路恒昌荣高新产业园4号厂房8楼A区

【联系方式】0755-27393226

【售后服务单位名称】深圳市华晨阳科技有限公司

【联系方式】0755-27393226【传真】0755-27381080

【邮政编码】518103

【生产地址】深圳市宝安区沙井街道洪田上南东路恒昌荣高新产业园4号厂房8楼A区

【生产备案凭证编号】粤深食药监械生产备20160019号

【医疗器械备案凭证/产品技术要求编号】粤深械备20180466号

【说明书核准日期及修改日期】2018.10.11

深圳市华晨阳科技有限公司病毒采样管官网  https://www.huachenyang.com  

病毒采样管的具体用处

病毒采样管的具体用处

 

日常病毒采样管用于搜集流感病毒,手足口病毒,麻疹风疹病毒及相关样本。它在2-8°C下短时刻存储和运送,并在-80°C下在冰箱或液氮环境中长时刻存储。

病毒采样管的具体用处:1.该病毒采样管一般于临床患者流感病毒和手足口病毒,以及风疹病毒等样品的核酸提取和后期病毒分离等。所需的液体量一般为35m或5m。(需要与核酸检测试剂盒和孢子培养基配合使用)2.病毒采样管可用于外部环境中禽流感病毒的搜集和短期运送。所需的液体量一般为6ml。3.病毒取样管可用于家禽,猪和其他动物的日常监测和取样。所需的液体量一般为15m。4.病毒采样管可用于病毒样品的短期存储(在2-8C下48小时,在20°C下一个F5,在70°C和-196°C下用于长时间保存病毒样品)。一年)6.病毒采样管用于搜集临床呼吸道病毒快速检测试剂盒,以检测国家资料。7.病毒采样管可用于搜集支原体,衣原体和脲原体的临床样品。

十一、【厂家信息】

【生产企业名称】深圳市华晨阳科技有限公司

【住所】深圳市宝安区沙井街道洪田上南东路恒昌荣高新产业园4号厂房8楼A区

【联系方式】0755-27393226

【售后服务单位名称】深圳市华晨阳科技有限公司

【联系方式】0755-27393226【传真】0755-27381080

【邮政编码】518103

【生产地址】深圳市宝安区沙井街道洪田上南东路恒昌荣高新产业园4号厂房8楼A区

【生产备案凭证编号】粤深食药监械生产备20160019号

【医疗器械备案凭证/产品技术要求编号】粤深械备20180466号

【说明书核准日期及修改日期】2018.10.11

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